非變性凝膠電泳，也稱(chēng)為天然凝膠電泳，與非變性凝膠電泳最大的區(qū)別就在于蛋白在電泳過(guò)程中和電泳后都不會(huì)變性。最主要的有以下幾點(diǎn)：

1. 凝膠的配置中非變性凝膠不能加入SDS，而變性凝膠的有SDS。
2. 電泳載樣緩沖液中非變性凝膠的不僅沒(méi)有SDS，也沒(méi)有巰基乙醇。
3. 在非變性凝膠中蛋白質(zhì)的分離取決于它所帶的電荷以及分子大小，不像SDS-PAGE電泳中蛋白質(zhì)分離只與其分子量有關(guān)。
4. 非變性凝膠電泳中，酸性蛋白和堿性蛋白的分離是完全不同的，不像SDS-PAGE中所有蛋白都朝正極泳動(dòng)。非變性凝膠電泳中堿性蛋白通常是在微酸性環(huán)境下進(jìn)行，蛋白帶正電荷，需要將陰極和陽(yáng)極倒置才可以電泳。 5. 因?yàn)槭欠亲冃阅z電泳，所有的電泳時(shí)候電流不能太大，以免電泳時(shí)產(chǎn)生的熱量太多導(dǎo)致蛋白變性，而且步驟都要在0-4度的條件下進(jìn)行，這樣才可以保持蛋白質(zhì)的活性，也可以降低蛋白質(zhì)的水解作用。這點(diǎn)跟變性電泳也不一樣。

所以與SDS-PAGE電泳相比，非變性凝膠大大降低了蛋白質(zhì)變性發(fā)生的機(jī)率